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胶体金免疫层读卡仪的功能和原理
文章来源:深芬仪器    时间:2020-01-02 17:54:56   

胶体金免疫层读卡仪的功能和原理

胶体金(colloidal gold)是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,金离子还原后聚合成的一定大小的金颗粒,它由一个基础的晶核(11个金原子形成的二十面体)和包围在外的双离子层构成(内层为负离子层AuCl2-,外层是带正电荷的H+)。由于静电作用,金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,故称胶体金。


胶体金具有高电子密度,能与多种生物大分子结合,已成为继荧光素、放射性同位素和酶之后,在免疫标记技术中较常用的一种非放射性示踪剂。胶体金的粒径一般在1-100nm之间,能够均匀、稳定地分散在液体中,呈球形小颗粒或椭圆形大颗粒。胶体金颗粒最外层可以吸附大量的正离子,能够均匀分散在溶液中。由于胶体金表面呈负电性,能够与表面带正电荷的抗原、抗体通过静电作用进行标记。


胶体金免疫层读卡仪可以检测血凝法、酶联免疫法、胶体金法制成的兽药、瘦肉精、抗生素、动物疫病等快速检测卡;金标读卡仪广泛应用于医院学校、养殖场、屠宰场、肉产品深加工企业、检验检疫等单位的食用。传统的金标诊断试剂,主要通过目测观察来判断检验结果,只能用于定性检测,而且受人为因素影响较大,检测结果无法进行数据保存,不便于追踪溯源和历史记录的查询,胶体金免疫层读卡仪可以读取检测卡量化的结果值,取代了传统肉眼观察结果的方式,使得检测结果更加的精准,客观,稳定。

胶体金免疫层读卡仪

胶体金法检测原理


将特异性的抗体以条带状固定在膜上(T线),胶体金标记试剂吸附在结合上(金垫),当待检抗原加到试纸条一端的样本垫上后,样本通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果。


胶体金技术优势与不足

优势

快速:所有反应能在15分钟内完成;

操作简便:便于个人自测或医院检测;

成本低:不需要特殊的仪器设备;

稳定性好:试剂效期可达两年或更长时间;


缺点

较ELISA、化学发光等方法灵敏度低;

易出现假阳性、假阴性;

存在HOOK效应;

胶体金试剂条组成

胶体金试纸条主要由样品垫、金垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水纸4个部分组成,从上至下依次首尾互相衔接,粘贴在PVC底板上。


作用

a. 样品垫:检测样本滴加位置,对检测样本具有一定的过滤和缓冲作用,降低样本中离子强度或酸碱度对检测结果的干扰。

b. 金垫:将胶体金标记抗体通过干燥固定在玻璃纤维素膜上,是追踪抗体与抗原的反应。

c. 硝酸纤维素膜:膜上预先包被上检测线和质控线,能够与胶体金标记物发生免疫反应相结合,使胶体金在检测线发生聚集,根据检测线的显色状况进行判读结果。

d. 吸水垫:通过吸水作用使液体样品向上流动,带动金垫的金标抗体向上移动,从而与检测线的抗原发生反应。

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下一个:深芬仪器智能胶体金定量检测仪的原理及应用特点分析 2020-01-03
 
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